EMSA，所谓何者？

 

      凝胶迁移或电泳迁移率实验 (electrophoretic mobility shift assay, EMSA)是一种体外研究DNA结合蛋白（转录因子）和其相关的DNA结合序列（靶标基因的启动子序列）相互作用的技术，可用于定性和定量分析。

 

 

      EMSA，知其所以然！

 

      正如上方实验示意图所示， 蛋白质可以与核酸探针结合，电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢，即表现为相对滞后。通过竞争性对照组，可以验证实验的特异性。

 

 

      EMSA，难点与痛点

 

       EMSA实验是很多实验新手的拦路虎，不仅实验步骤繁琐（凝胶电泳，转膜，紫外交联，信号检测），而且实验与对照组较多（通常为5组，标记探针、标记探针+蛋白、标记探针+蛋白+未标记探针（特异竞争寡核苷酸）、标记探针+蛋白+未标记突变探针、标记探针+蛋白+抗体），经过多次测试优化才能获得理想的实验结果，综合成本非常高。

 

 

 

      突破EMSA，创新的新方法，Nature为您测试：

 

 

      作为表观遗传学的专业解决方案供应商，酷游ku119网址 科技为您推荐，Epigentek品牌创新推出的通用蛋白-DNA结合分析试剂盒（比色法）：

 

 

 

 

 

      * 客户需自行准备如下材料：[1]生物素标记的特异性探针; [2]未标记的特异性探针；[3]目标蛋白的一抗与HRP-二抗

 

 

      通用蛋白质-DNA结合分析试剂盒原理：

 

      通用蛋白质-DNA结合分析试剂盒（比色），用于测量核提取物中转录因子与DNA结合活性。在实验中，含有靶向转录因子的DNA结合共有序列的生物素标记的双链寡核苷酸（寡核苷酸）与结合试验缓冲液中的核提取物一起温育。核提取物中活性形式的转录因子与其共有序列结合。然后将寡蛋白复合物捕获到测定微孔上。靶蛋白可以通过高亲和力抗体识别，并通过检测抗体 - 显色试剂反应系统进行比色测量。

 

 

      产品特点与优势：

  

 

1.       1、最快的程序：完整的检测可在3小时内完成。

 


2.       2、可拆卸微孔板，使测定灵活：手动或高通量分析。

  

3.       3、比色法分析，无放射性材料，更安全。

 


4.       4、简单，可靠，一致的检测条件。

 

 

 

      Nature文章发表结果：

 

      《Klengel, Torsten, et al. "Allele-specific FKBP5 DNA demethylation mediates gene–childhood trauma interactions." Nature neuroscience 16.1 (2013): 33.》

 

 

      rs1360780基因的A/G等位基因与TBP的结合能力分析，A等位基因的亲和力明显高于G.

 

 

      更多发表文章，欢迎了解：

 

      Hekmat-Scafe DS et. al. (November 2016). Biochem Mol Biol Educ.

 

      Jang JY et. al. (February 2016).  Mol Cancer Ther.

 

      Koh J et. al. (October 2015).  OncoImmunology.

 

      Gao Y The Univer et. al. (June 2014).  J Lipid Res.

 

      * 通用蛋白质-DNA结合分析试剂盒说明书：

      Epigentek作为表观遗传学的专业解决方案供应商，在全球范围具有卓越的影响力，其推出的产品能够有效帮助研究者快速获得理想结果，不仅性价比绝佳，而且被大量文献引用，让您绝无后顾之忧！

 

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