夏天，最怕听到“热”这个字！有没有人跟小编一样，一听，就热？

 

 

      所幸，最近一节段还是炎夏来临前的雨季，全国范围内还是比较凉爽的，对于怕热的人生，再来一块清凉的“冰心”，才最爽！

 

 

      可见温度对生活的影响有多大，炎炎夏日，空调开高一度和低一度，有时候后就是天(da)差(han)地(lin)别(li).

 

      对于温度异常敏感的PCR实验，更是如此！

 

      每次PCR实验都要到处找冰盒，铲冰…… 各种怕温度敏感的酶在小小的PCR小管里发生不该发生的story，比如非特异扩增，悄悄地合成引物二聚体等，最后P出来各种条带，我们就要cry了。

 

       那么，如果我们使用了热启动DNA聚合酶，故事就不一样了。经过化学修饰的TaqDNA聚合酶，对温度“炒鸡”稳定，PCR加样再也不需要到处找冰盒铲冰，小心翼翼的忐忑了。HoT FIREPol®热启动DNA酶常温稳定一个月，只有温度达到95℃才会被激活。所以我们再也不必担心加样的过程以及升温之前，PCR就开始反应，合成不需要的片段。做到随意PCR 如吃瓜！

 

 

      好啦，言归正传，吃瓜的同时，我们来点专业解释：

      在传统的PCR反应中，反应体系各成分（Taq DNA聚合酶、dNTP 和引物等）均是一次加入并进入循环，在反应温度由室温（25℃）上升至高温（94～95℃）过程中，可能发生引物错配和二聚体的形成。引物与模板中一些非靶位点的错配和引物之间形成的二聚体，在Taq酶的作用下均可延伸，这些非特异性产物又可以在后面的PCR循环中继续扩增，使非特异性产物不断积累，同时，也消耗反应体系的各成分，最终PCR扩增的特异性产物大大减少。热启动PCR(hot start PCR)是指DNA聚合酶只有在样品温度至少超过70℃时才发挥作用的PCR。通过这种方式控制PCR反应的必须组分DNA聚合酶，直到反应混合物被加热到可以阻止非特异引导和引物聚合的温度后，再启动PCR达到有效扩增特异性PCR产物的目的。

 

      热启动PCR循环是这样的，为了充分激活酶，比普通PCR增加了热激活步骤。

 

 

 

      PCR的灵魂—热启动DNA聚合酶

 

      与TaqDNA酶不同，热启动DNA聚合酶是经过化学修饰的Taq酶，常温操作时其没有活性，只有高温才能激活酶，可以避免低温或者常温操作时非特异性扩增以及引物二聚体的产生。这款Solis 热启动 FIREPol DNA 聚合酶更灵敏，特异性更强，可以常温操作，常温稳定1个月。同时，PCR产物可以无忧做下游实验DHPLC和TA克隆。

 

热启动PCR-第一款

热启动DNA聚合酶组合套装（货号# 01-02-xxxxx）

 

      给你最大自由度的一款PCR组合，它的组分有：

 

      1.热启动DNA 聚合酶

      2.反应buffer1---10x 反应液B1(不含Mg2+和去污剂)

      3.反应buffer2---10x 反应液B2 (不含Mg2+)

      4.25 mM MgCl2

      5.10x Solution S

 

      细心的同学已经发现，为什么一般的PCR体系只有一个buffer，而这个却有两个？

 

      小编为你解密啦！之所以包含两款Buffer 是为广大用户考虑的，如果你的样本不需要去污剂，或者需要自由调整Mg2+浓度，这款给你最大自由度 ，可以按照您实验需求调整方案。而这款套装的最大的宝藏是组分Solution S，常规PCR不需要它，但是如果你遇到扩增困难的模板，或者高GC含量模板，10x Solution S 就要登场啦，并且你可以根据需要调整它的工作浓度，1×，2×，3×.

 

      漂亮的数据告诉你它有多好！

 

      数据显示HoT FIREPol®热启动DNA酶可以很好的扩增基因组DNA片段

 

 

扩增人基因组DNA的4个片段：1，2为HoT FIREPol®DNA聚合酶；3,4为竞品A公司；5,6为竞品B公司。

 

      如果您需要热启动PCR预混液，这里有多功能热启动PCR预混液，因为篇幅有限，这里给大家列表展示:

 

 

      *扩增片段范围：可以扩增各种类型DNA模板的片段，如cDNA, λDNA，质粒DNA等，扩增片段＜5kb; 以及多物种的基因组DNA （人、动物、植物等）,扩增片段＜3kb .

 

      这些试剂盒有多好，性价比有多高呢？ 一组漂亮的数据告诉你：

 

      HOT FIREPol®高GC含量预混液在GC含量高达79％的模板上表现良好!

 

 

      扩增多种高GC含量片段

      使用高GC含量PCR预混液从人gDNA扩增出12种高GC的基因。 DNA模板和DMSO的终浓度分别为1 ng /μl和10％。

 

      HOT FIREPol® 多重PCR 预混液进行4、8、14、18多重PCR检测， 表现敏感而特异！

 

 

      多重PCR扩增

      人类gDNA的不同基因在使用HOTFIREPol®MultiPlex Mix进行多重反应。扩增了122 bp到1340 bp的DNA片段，显示相似的高产量和高特异性，同时进行了4、8、14和18多重PCR检测。

 

      HOT FIREPol®高保真PCR可以高度特异而准确的扩增多种长度DNA片段

 

 

    

       当然还有优秀的参考文献：

 

 

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