固定缓冲液

福尔马林（10%，中性缓冲液）

3.7-4% 甲醛（37-40%）

33mM 磷酸二氢钠

46mM 磷酸氢二钠（无水）

多聚甲醛（4%，中性缓冲液）

8% 的多聚甲醛

0.2M 磷酸盐缓冲液(PBS)，pH值7.4

53mM 磷酸二氢钠

154mM 磷酸氢二钠

8% 多聚甲醛溶液配制时应60°C 加热搅拌（温度不要超过60°C）。溶液达到60°C 时多聚甲醛溶解，加入500ml 0.2mM 磷酸盐缓冲液，使0.1mM 磷酸盐缓冲液中含4% 多聚甲醛。小心滴加1 当量的氢氧化钠溶液直至溶液澄清（每500ml 滴加1 至2 滴；如果仍未澄清，可继续滴加。或者，可在1 至2L 溶液中加入2 粒固体氢氧化钠）。溶液变冷后过滤。
溶液的pH 值应为7.4。不要用酸或碱来调节pH 值！如需要调节，可另配制0.2 M 溶液来调节，溶液可使用单碱或双碱的磷酸钠配制（视实际情况而定）。

(多聚甲醛应新鲜配制。如4°C 过夜保存，第二天使用固定效果不如当天配制的好。可以将多聚甲醛溶液-20°C 冻存，但为了结果的一致性，组织样本要么都用新鲜配制的多聚甲醛固定，要么都用新鲜融解的多聚甲醛固定。)

Bouin 溶液（特别用于保存质地软、结构精细的组织，如脑组织）

75ml 苦味酸（饱和的）

25ml 甲醛(37-40%)

5ml 冰乙酸

充分混合

抗原修复液

柠檬酸钠缓冲液，pH 值6.0

10mM 柠檬酸钠（二水枸橼酸三钠）

0.05% 吐温20

混合溶解枸橼酸钠，用1N 盐酸调节pH 值至6.0。

加入吐温20 并充分混合。

室温可保存3 个月，置于4°C 可保存更长时间。

三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸缓冲液，pH 值9.0

10mM 三羟甲基氨基甲烷碱

1mM 乙二胺四乙酸

0.05% 吐温20

混合溶解，调节pH 值至9.0。加入吐温20 并充分混合。

室温可保存3 个月，置于4°C 可保存更长时间。

含酶的抗原修改缓冲液：

胰蛋白酶储液

0.5% 胰蛋白酶

蒸馏水融解后-20°C 冻存。

氯化钙储存液(1%)

1% 氯化钙

蒸馏水融解后4°C 保存。

胰蛋白酶工作液

0.05% 胰蛋白酶（用0.5% 胰蛋白酶储存液配制）

0.1% 氯化钙（用1% 氯化钙储存液配制）

8ml 蒸馏水

蒸馏水融解，用1M 氢氧化钠调节pH 值至7.8

4°C 可保存3 个月，置于-20°C 可保存更长时间